Метод окраски по Граму

Фиксированный мазок окрашивают карболовым раствором генцианового фиолетового в течение 1-2 минут.

1.В течение 1 минуты обрабатывают мазок раствором Люголя.

2.Обесцвечивают спиртом 10-20 сек.

3.Промывают водой.

4.Докрашивают мазок водным раствором фуксина 1-2 минуты.

NB! Метод окраски по Граму является важным диагностическим методом. Все бактерии по отношению к окраске по Граму делятся на грамположительные - темно-фиолетового цвета и грамотрицательные - красного. Способность окрашиваться в тот или иной цвет зависит от строения их клеточной стенки и коррелирует со многими другими свойствами бактерий. У грамположительных бактерий в клеточной стенке отсутствуют ароматические и серосодержащие аминокислоты, отмечается низкое содержание липидов, у грамотрицательных, напротив, эти вещества содержатся в большом количестве. Кроме того, у грамположительных бактерий имеется магниевая соль рибонуклеиновой кислоты, отсутствующая у грамотрицательных. Она и образует прочный химический комплекс с белком, генцианвиолетом и йодом, который не разрушается при кратковременном действии спирта. У грамотрицательных такой комплекс не образуется. Они легко обесцвечиваются под действием спирта. Фуксин докрашивает грамотрицательные микроорганизмы в красный цвет.

Мазок из смеси культур S.epidermidis и E.coli. Окраска по Граму. «Карпова М.Р., Жданова О.С., 2010 г.»